Pcr анализ - какво е: диагностичен метод и декодиране

Съдържание:

Anonim

Тези, които се интересуват от нови методи за диагностика, трябва да научат какво е PCR методът. Съвременните технически възможности в областта на лабораторните изследвания дават възможност за идентифициране на много болести в началните етапи. Полимеразната верижна реакция (PCR) понастоящем се счита за най-точен и нов метод.

PCR анализ

PCR анализ - какво е това? Този метод използва принципите на молекулярната биология. За изследване на материала се използват специални ензими, които многократно и бързо копират ДНК, РНК фрагменти от патогени. Има различни видове PCR анализ в зависимост от изследваните материали (кръв, урина, фекалии и др.). След обработка, лабораторните служители сравняват с базата данни получените резултати, идентифицират концентрацията, вида на патогена.

PCR анализът се поставя в специален усилвател (инструмент), който нагрява и охлажда епруветките с биоматериал. За репликацията на фрагменти са необходими температурни промени. Точността на резултата ще зависи от точността на температурния режим. Методът на полимеразна верижна реакция помага да се идентифицират:

  • инфекциозна мононуклеоза;
  • ХИВ;
  • цитомегаловирусна инфекция;
  • вирусен хепатит G, С, В, А;
  • полово предавани инфекции / болести (ППИ / ППБ): гарднерелоза, трихомониаза, уреаплазмоза;
  • херпесна инфекция;
  • онкогенни вируси;
  • листериоза;
  • Инфекция с Helicobacter pylori;
  • кленов енцефалит, борелиоза;
  • туберкулоза;
  • кандидоза.

кръв

В момента, поради новостта на технологията, изследването на кръвта по метода на PCR все още има висока цена. За приготвянето на биоматериал не е необходимо да се спазват определени изисквания. Дори промените в състава, причинени от физическо натоварване, стрес и промяна в диетата, не влияят на резултата от изследването. PCR кръвен тест може да развали само приема на антибактериални агенти, затова преди преминаване е необходимо да се поддържа пауза между лечението и теста.

PCR кръвните изследвания са най-разпространеният начин за диагностициране на хронични, остри инфекциозни патологии при вирусни или атипични прояви. Методите за серологични изследвания имат известни затруднения при провеждането - определянето на наличието на патогена се извършва чрез наличието на антитела в човешкото тяло. Резултатът може да бъде фалшиво отрицателен, ако състоянието на пациента не дава време за тяхното производство.

намазка

В областта на гинекологията се използва PCR за изследване на наличието на инфекциозни микроорганизми. Работата с материала се извършва по същия принцип, както с кръвта: многократно увеличаване на патогенните ДНК фрагменти с цел лесното му идентифициране. Той също така помага за откриване на скрити инфекции при жените. За анализ могат да се вземат различни биологични течности: слюнка, слюнка, урина и кръв. В гинекологията често се използва тампон от вагиналната лигавица от цервикалния канал, за да се определи точността.

За PCR има някои индикации. Често трябва да се направи, за да се идентифицира видът на патогените, резистентни към антибиотици. При жените основните показания за диагностицирането на този метод са:

  • бременност, която продължава усилено;
  • остра фаза на ППИ;
  • ако има съмнение за преход на ППИ към хроничния стадий;
  • търсене на причини за безплодие.

Кала

За да се идентифицира инфекцията, може да се назначи лекар от анализа на изпражненията за PCR. За да получите най-надеждните резултати след теста, трябва да спазвате следните правила, преди да съберете биоматериала:

  • в продължение на няколко дни да спре да приема лаксативи наркотици: масло, свещи;
  • премахване на лекарства, които придават специфичен цвят на изпражненията, например, със съдържание на желязо.

За оградата трябва да се използва стерилна пръчка и контейнер. Нещо допълнително ги избършете, изплакнете не е необходимо. Когато събирате материал, внимавайте да не докосвате с ръце вътрешните стени на контейнера. Уверете се, че изпражненията не са примеси на урината, не можете да използвате допълнителни средства за изпражненията (клизма). Необходимо е материалът да се събира в деня на доставката, 1/3 от обема на контейнера е достатъчен. Този диагностичен метод има следните предимства:

  1. Анализът може да покаже ДНК на паразита, докато други тестове могат само да открият остатъци от тяхната жизнена активност.
  2. Висока точност, патогенът ще бъде инсталиран.
  3. Ултра чувствителен анализ, който може да открие дори една клетка на вируса.
  4. Резултатът от PCR теста ще бъде готов за 4-5 часа.

урина

Ако е необходимо, лекарят може да вземе урина за изследване. Високата точност отваря възможността за работа с всякаква биологична течност, от която може да се екстрахира вирусната ДНК. За да преминете през анализа на урината на PCR, трябва да се придържате към такива ограничения преди да вземете материала:

  • най-малко 1 ден преди процедурата, спрете секса;
  • 3 седмици преди раждането, всяко антибактериално лечение трябва да бъде завършено, тъй като лекарствата ще намажат картината;
  • необходимостта да се направи анализ на празен стомах (течност също е забранена);
  • трябва да вземете първата част от материала.

Резултати от PCR теста

От гореизложеното става ясно какво е PCR анализ и има ясни предимства на такъв изследователски метод. Друг плюс на тази диагностична процедура е лекотата на декодиране на резултатите. Като се има предвид колко PCR анализ се извършва (самият процес отнема около 5 часа, но лабораторията предоставя данни за 1-2 дни), този диагностичен метод става най-добрият вариант за откриване на множество инфекции. Според резултатите лекарят може да ви каже, че тестът:

  1. Отрицателен - в изследвания материал не е бил желаният патоген.
  2. Установена е положителна РНК, патогенна ДНК.

Понякога се извършва количествено определяне на микроорганизми. Това е необходимо за заболявания, които причиняват опортюнистични патогени. Особеността на тези вируси е, че те се появяват само когато са в излишък и е изключително проблематично да ги намерите чрез рутинни изследвания. Този фактор е важен за избора на терапевтична тактика за ефективно лечение на вирусни инфекции, например хепатит, HIV.

За 12 инфекции

За да разберете напълно каква е PCR диагнозата на инфекциите и колко е ефективна, трябва да знаете, че тя е способна да изолира до 12 патогени. Текстът се провежда само в лабораторни условия. За изследването са използвани специални ензими, които увеличават многократно количеството РНК, ДНК фрагменти на вируса. PCR анализ за 12 инфекции може да разкрие:

  • Mycobacterium tuberculosis;
  • ХИВ;
  • цитомегаловирус;
  • хепатит С, G, В, А;
  • херпес тип 1, 2;
  • Вирус на Epstein-Barr (инфекциозна мононуклеоза);
  • инфекции, които се предават на плява чрез, например, хламидия;
  • листериоза;
  • HPV;
  • кандидозна инфекция;
  • Helicobacter pylori;
  • борелиоза, клетъчен енцефалит.

Хепатит С

Този диагностичен метод помага да се определи наличието на вирус в кръвта. Това дава възможност на лекарите да говорят за неговото присъствие или отсъствие. PCR анализът за хепатит С е два вида: качествен и количествен. Първата опция показва само нейното присъствие и може да има израза "открит" / "не е открит". Този тип тест има чувствителен 10-500 IU / ml. Това предполага, че при ниско съдържание на патоген в организма, анализът ще бъде "неоткрит".

Количественият анализ е по-точен и ще покаже концентрацията на инфекцията в кръвта. Този индикатор се нарича "вирусен товар", измерен в количеството на вирусна РНК за специфичен кръвен обем. Декодирането в различни лаборатории може да варира. В допълнение към измерването, единиците за измерване "копие" се използват в IU / ml Преизчисляване на копия на ME може да се извърши по формулата: 1 IU = 4 копия. Ако при декодиране стойността на наличието на вирус надвишава 800, 000 IU / ml (или 800 * 103), това показва високо съдържание на патогена.

За туберкулоза

Направете теста сутрин. Това е важно, за да не се допусне целият масив от храчки, който се образува за една нощ, да напусне стомаха. PCR анализът за туберкулоза е също толкова важен, колкото ELISA, манто, томограф. Тестът помага да се установи наличието на микобактерии, състояние на урината, общ имуноглобулин, ESR, за да се определи състоянието на белите дробове в момента. За точността на получаване на резултатите при анализа на PCR е необходимо да се провежда в съответствие със следните правила:

  1. Засяването се извършва 3 пъти, но пълната аспирация на стомашното съдържание трябва да се извършва само в болницата.
  2. Открива микобактериите, посяващи наличието на маси в стомаха при по-малко от 50% от диагнозите. Дори при оптимални условия се препоръчва ултразвук.
  3. Дори при отрицателен характер на резултата, вероятността от развитие на туберкулоза с промяна на СУЕ, имуноглобулин или други показатели не може да бъде напълно изключена.
  4. Засяването на материали по време на PCR е по-малко чувствително към патологични състояния, ако е било получено като част от бронхоскопско изследване, което елиминира съмнението за туберкулоза при дете.

За ХИВ

За много хора тази диагноза се смята за смъртна присъда. Поради тази причина, след чести сексуални контакти, човек става по-внимателен към сигналите, които тялото му дава (а понякога и с тях). Най-надеждният вариант за получаване на потвърждение или отричане на това заболяване е PCR тест за HIV. Тестът може да се използва за определяне на следните възможни здравословни проблеми:

  1. Отричане / потвърждаване наличието на ХИВ в периода на серонегативна кон.
  2. Определяне на генотипа на HIV-1, HIV-2.
  3. Изясняване на описанието на патологичния процес с съмнителен резултат от имуноблота.
  4. Инфекция след кръвопреливане.
  5. Дефиниции за ХИВ статус при деца, родени от майки на болестта.
  6. Той помага да се установи мониторинг на вирусния товар на организма.

HPV

Папиломавирусът може да бъде открит при всеки човек, за дълго време той може да бъде в латентно състояние. Развитието провокира отслабване на имунната система, стрес или емоционални изблици. PCR анализът на HPV помага да се определи концентрацията на вируса в кръвта. Поради тази причина се препоръчва да се извърши количествено определяне, а не качествено. Тези данни ще помогнат да се предвиди вероятността от злокачествен характер на инфекцията.

Диагностичната техника за присъствието на HPV се основава на основното свойство на PCR да изолира вирусната ДНК от материала. Поради високата чувствителност на теста ще се открие дори малко количество бактерии. Количественото изследване дава възможност на лекарите да установят степента на опасност от заболяването, да направят прогноза за бъдещето. Тази диагноза е необходима за всички мъже и жени, които са намерили брадавици. Количественият анализ на PCR ще помогне да се определи причината за развитието на HPV: временно намаляване на имунитета или хронично заболяване.

За херпес

Този тип диагноза в микробиологията помага с голяма точност да се извърши PCR анализ за херпес. Вирусните ДНК фрагменти ще бъдат копирани само ако желаният ген присъства в материала. В този случай тестът на резултатите може да покаже наличието или отсъствието на патогена. Идентифицирайте го е възможно дори при ниски концентрации в кръвта.

Друго предимство на PCR анализа е, че той може да открие херпесна вирусна инфекция веднага след инфектирането, преди началото на клиничните симптоми. Можете да определите вида херпес (1 или 2), за анализ на специфично обучение не се изисква, но лекарите препоръчват преди да дадете кръв:

  • печено;
  • остра;
  • алкохол;
  • мазнини.

По време на бременността

При носене на дете е много важно да се проведе това изследване, за да се регистрира статута на жената. PCR анализът по време на бременност е включен в списъка на най-ефективните методи за определяне на наличието на различни заболявания. Необходимо е да се извърши тест не само за да се идентифицират патологиите, но и да се определи вероятността от заразяване на детето в утробата. Само благодарение на PCR-диагностиката е възможно да се идентифицира степента на прогресия, развитието на множество инфекции в утробата на майката.

PCR тестване

Ако се интересувате от начина на вземане на PCR анализ, тогава трябва да обмислите всеки отделен случай, като вземете предвид вида на биоматериала. Изстъргването, намазването или вземането на кръвни проби имат свои собствени характеристики, например:

  • плазмените предавания сутрин;
  • урината се приема само първата сутрин, в лаборатория в стерилен контейнер;
  • намазка или остъргване ще бъдат показателни само след въздържание от сексуален контакт в продължение на поне 3 дни;
  • Не можете да вземете намазка по време на менструация и 2 дни след него.

Къде да преминат тестове за PCR

Този тип изследвания са свързани с модерни и високотехнологични диагностични методи. За да бъдат тествани чрез PCR трябва да бъдат в лабораториите, които имат всички необходими комплекс за получаване на пълни резултати. Също толкова важно е квалифициран, обучен персонал. Дайте предпочитание на големи, сериозни, добре познати лаборатории. Това ще помогне не само за бързо получаване на резултати, но и за гарантиране на тяхната надеждност.

цена

Друг въпрос, който често интересува пациентите: колко струва анализът на PCR? Поради новостта на метода, необходимостта от закупуване на скъпо оборудване, цената на теста е сравнително висока. Цената на PCR се влияе от вида инфекция, която ще бъде тествана от човек. Приблизителна цена и време за провеждане на тестовете, както следва:

  1. В 1 ден се проверява STI, като цената е 400-500 рубли.
  2. Херпес, HPV, вирус Epstein-Barr, цитомегловирус се открива на ден, цената е 300-500 r.
  3. Анализът за хепатит се извършва за 5 дни, цената на качествения вариант е 500 рубли, а количественият е 2000 рубли.
  4. Helicobacter pylori се открива на ден, цената е 400 р.
  5. Антигени, ХИВ антитела, цена - от 380 р.
  6. Качествен анализ на ХИВ РНК, цена - от 3 500 p.
  7. Количествен анализ на ХИВ РНК, цена - от 11 000 r.

видео